(Bora)²

Abstract: Metodo di estrazione di zooxantelle da tridacna sp su campione omogeneo e preparazione di una coltura di zooxantelle (procedura di Doimi M. 2010)

Materiali e metodi:
coltello da cucina;
filtro;
fertilizzante NuSalts (contenuto: NaNO3 30,0 % ; NaH2PO4 ∙H2O 2,0 %; Na2EDTA 2,0% ;FeCl2 ∙6H2O 1,26 %; CuSO4 ∙ 5H2O 0,004 % ; ZnSO4 ∙ 7H2O 0.0084% ; CoCl2∙ 6H2O 0,004%; MnCl2 ∙ 4H2O 0,008%; Na2MoO4 ∙2H2O 0,001% ; blotin 5 ug/L; Cyanocobalamin 5 ug/L; Inerts 64,0%;)
pallone da 6 L;
tiosolfato di sodio;
clorimetro;
acqua di mare;
acqua dolce;
areatore;
gorgogliatore;
salinometro;
ipoclorito di sodio;
bilancia (Kern EMB 220-1);
cilindro graduato;

Descrizione:
Due esemplari di Tridacna sp., colorazione simile, vengono aperti con l'ausilio di un coltello da cucina e viene asportata la parte di mantello colorata.
Il mantello viene strofinato su una superficie liscia ienergicamente ed in modo tale che questo rilasci un liquido scuro contenente zooxantelle e proteine.
Questo liquido viene raccolto e lasciato in acqua dolce a temperatura ambiente per 15 minuti in modo che muoia tutto il contenuto del liquido tranne le zooxantelle, filtrato, ed inserito all'interno di un pallone contenente una soluzione 30x1000 di acqua di mare sterilizzata e concimata con l'aggiunta di una spatolata di fertilizzante ed inserito un gorgogliatore.
Al fine di mantenere sterile la soluzione, il collo del pallone deve essere riempito di cotone.
Il livello del liquido all'interno del pallone viene mantenuto fisso, mettendo acqua dolce per compensare quella evaporata.

Sterilizzazione acqua di mare:
A 5L di acqua di mare viene aggiunto 1 cl di ipoclorito di sodio per ogni litro e il tutto lasciato a riposo per 12 ore.
Dopo questo tempo viene aggiunta all'acqua 1mg/lL di tiosolfato di sodio per neutralizzare l'ipoclorito di sodio.
Per assicurarsi che non siano rimasti residui di ipoclorito di sodio nel liquido si esegue un misurazione del cloro con l'ausilio di test pH-cloro.

Risultato:
La procedura appena descritta non è stata portata a termine a causa di una spiegazione non corretta di uno dei passaggi appartenenti al metodo riportato in questo post.